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胞质内DNA依赖的干扰素调节因子激活物在HBV复制中的作用

Effect of the cytoplasmic DNA sensor DAI on replication of hepatitis B virus

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资源类型:
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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学中心 [2]温州医科大学附属舟山医院 [3]华中科技大学同济医学院附属协和医院感染性疾病科
出处:
ISSN:

关键词: 肝炎病毒 乙型 肝细胞 干扰素Ⅰ型 DNA识别蛋白

摘要:
目的观察细胞质内的DNA依赖的干扰素调节因子激活物(DAI)对HBV复制的影响,并初步探讨其影响机制。方法首先将siDAI与HBV1.3复制型质粒pHY106共转染HepG2细胞,实验分两组:一组转染后6h,提取细胞总RNA,实时定量RT-PCR检测细胞内干扰素诱导的含三角形四肽重复蛋白(IFIT)1与白细胞介素6的表达水平。另一组在转染后第4天收集细胞上清液,酶联免疫吸附法检测HBsAg与HBeAg的表达水平;抽提细胞内的HBV核心颗粒,Southernblot检测细胞内HBV复制中间体(松弛环状DNA、双链线性DNA、单链DNA)。然后将siDAI、siTBK与HBV 1.3复制型质粒pHY106共转染HepG2细胞,同样方法检测转染后细胞上清液中HBsAg和HBeAg的表达。两组间均数比较采用独立样本t检验,多组间比较采用方差分析。结果 siDAI转染导致了胞内DAI表达下调;DAI表达水平下降后HBV的复制与病毒蛋白表达受到了抑制:HBsAg和HBeAg的相对表达水平在siDAI组分别为0.0195±0.0050、0.0140±0.0040,在空白对照组为0.3150±0.0200、0.0124±0.0135,差异有统计学意义(t=14.770,P(0.05;t=7.777,P(0.05);且抑制效果呈剂量依赖性。下调DAI后,对HBV诱导的IFIT1、白细胞介素6表达没有影响(P)0.05)。同时下调DAI和TBK1后,HBV蛋白表达仍然受到抑制。结论下调DAI能抑制HBV的复制与蛋白表达,其机制与I型干扰素及核因子-κB信号通路无关。

基金:

基金编号: 30700701

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第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学中心 [2]温州医科大学附属舟山医院
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