摘要:
目的构建表达重组草酸降解酶的乳酸菌,并探讨对高草酸尿症大鼠的治疗作用。方法将草酸脱羧酶(oxalate decarboxylase,ODC)和草酸氧化酶(oxalate oxidase,OxO)基因与表达质粒pMG36e重组,通过电转化将重组质粒转入乳酸菌MG1363中。在含100mmol/L草酸的培养液中培养48h,测量其生长情况及培养液中草酸含量变化。以含5%草酸食物喂养SD大鼠,并同时进行重组乳酸菌灌胃治疗,1周后收集大鼠24h尿液测量草酸含量。结果成功构建重组pMG36e-ODC,pMG36e-OxO乳酸菌,两者都可在含100mmol/L草酸的培养液中生长,20h左右开始进入对数期,40h左右进入稳定期。其中pMG36e-ODC乳酸菌可明显降低培养液内草酸浓度,48h内可降解30%,而培养pMG36e-OxO乳酸菌和正常乳酸菌后培养液中草酸含量无明显变化,48h内草酸含量水平下降了约15%。pMG36eODC乳酸菌喂养可显著降低高草酸饮食大鼠尿液中草酸含量。结论重组ODC乳酸菌可有效降解草酸,并可通过降解食物中草酸缓解模型大鼠高草酸尿症。