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文章类型:
单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,武汉430030
华中科技大学同济医学院附属同济医院
外科学系
泌尿外科
出处:
ISSN:
关键词:
草酸钙结石
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4
氧化应激
成骨相关蛋白
摘要:
目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4(Nox4)在草酸钙结石患者肾乳头中的表达及其作用机制。方法:通过GEO数据库检索Randall钙斑芯片,按照GSE73680的样本描述,将样本分为无结石对照组(6例)和草酸钙结石组(24例)。采用GEO2R分析正常人肾乳头和草酸钙肾结石患者肾乳头组织中Nox4及成骨相关蛋白基因的表达差异变化。采用高钙处理大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),免疫荧光技术(IF)检测Nox4的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测Nox4和骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达,化学发光法测定氧化应激标志物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。组间比较采用
t检验。
结果:GEO2R分析结果显示Nox4在草酸钙结石组表达升高,差异表达倍数为0.726倍(
t=2.040,
P<0.05),基质Gla蛋白(MGP)在草酸钙结石组表达下降,差异表达倍数为-1.228倍(
t=-1.230,
P>0.05),骨钙素(OCN)在草酸钙结石组表达升高,差异表达倍数为0.439倍(
t=1.241,
P>0.05),骨保护素(OPG)在草酸钙结石组表达升高,差异表达倍数为0.639倍(
t=0.888,
P>0.05),骨桥蛋白(OPN)在草酸钙结石组表达升高,差异表达倍数为1.664倍(
t=1.171,
P>0.05)。免疫荧光结果显示高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的平均荧光吸光度明显高于对照组(0.651、1.446、1.480,
t=8.023、6.477,
P<0.05)。Western blot显示相对于未处理的正常对照组,高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的表达明显增加(0.426、0.594、0.734,
t=28.954、53.082,
P<0.01),BMP-2表达也呈增高趋势(0.242、0.472、0.676,
t=12.765、14.257,
P<0.01)。此外,高钙处理NRK-52E细胞后,MDA含量增加(0.188、0.390、0.650,
t=2.679、6.686,
P<0.05),SOD活性下降(40.630、38.060、36.230,
t=4.079、10.390,
P<0.05)。
结论:Nox4在肾结石患者肾乳头中表达明显增加,Nox4介导的氧化应激可能在肾结石形成过程中发挥重要作用。
基金:
国家自然科学基金面上项目(81770704)
第一作者:
第一作者单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,武汉430030
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
寻阳,王少刚.烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4在草酸钙结石患者肾乳头中的表达及其机制[J].中华实验外科杂志.2020,37(08):1425-1427.