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婆罗双树样基因4 shRNA干扰载体的构建及其对THP-1细胞的转染

Construction of SALL4 shRNA vectors and THP-1 cell transfection

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 中华系列

作者:
单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科
出处:
ISSN:

关键词: 癌基因 SALL4 短发夹RNA THP-1细胞 RNA 小分子干扰

摘要:
目的构建针对婆罗双树样基因4(SALL4)的特异性shRNA干扰载体,并转染THP-1细胞,以期为更深入了解SALL4对白血病的作用,为后续研究提供实验工具。方法设计4条针对不同靶点的SALL4特异性siRNA和一条阴性干扰siRNA,分子克隆方法构建pGPU6/GFP/Neo/SALL4shRNA干扰载体,转染THP-1细胞,比较未转染细胞、阴性干扰转染细胞和4条SALL4 shRNA转染细胞的SALL4表达情况,找出干扰效果最好的SALLA shRNA。结果 4种SALL4 shRNA均能有效转染THP-1细胞,实时定量PCR(RT-PCR)与Western blotting结果均显示针对靶点mRNA-1 122的pGPU6/GFP/Neo/SALL4 shRNA-B干扰效果最佳,SALL4表达减少量最多(P(0.05)。结论成功构建SALL4 siRNA干扰载体,可选择SALL4 shRNA-B载体进一步完成对SALL4基因功能的研究工作。

语种:
第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科
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