摘要：
目的 观察内皮素-1(ET-1)对人小梁细胞(TMCs)吞噬功能的影响及作用机制.方法 取培养第3代人TMCs,与直径0.5μm荧光标记的乳胶微粒共孵育0、4、8、12、24、48、72h,荧光显微镜下动态定量观察人TMCs吞噬动力学.取6孔板培养3代人TMCs,随机分为4组,观察不同浓度ET-1对人TMCs吞噬功能的影响:对照组(0mol/L ET-1)、低剂量组(10~(-9)mol/L ET-1)、中剂量组(10~(-8)mol/L ET-1)、高剂量组(10~(-7)mol/L ET-1),分别与乳胶颗粒共孵育后观察各组细胞吞噬乳胶颗粒数.取6孔板培养人TMCs随机分为4组,观察内皮素受体对吞噬功能的影响:对照组(0mol/L ET-1)、ET-1组(10~(-8)mol/L ET-1)、ETA受体拮抗剂组(10~(-8)mol/L ET-1+10~(-7)mol/L BQ123)、ETB受体拮抗剂组(10~(-8)mol/L ET-1+10~(-7)mol/L BQ788),并分别与乳胶颗粒共孵育,观察各组人TMCs吞噬乳胶颗粒数.结果 人TMCs免疫组织化学鉴定纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、神经元特异性烯醇酶(NSE)染色均呈阳性;Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)染色阴性;人TMCs吞噬动力学观察示,人TMCs与乳胶颗粒共孵育4h后可见明显的吞噬颗粒,随时间延长吞噬微粒数明显增多,24h吞噬微粒密度最佳,48h吞噬微粒达到饱和,细胞形态改变;加入ET-1干预后,细胞内吞噬乳胶微球数明显减少,其吞噬抑制效果呈ET-1浓度依赖性(F=28.91,P＜0.05);ET-1组吞噬颗粒数较对照组减少(q=13.7228,P＜0.05),而ETA受体拮抗剂组吞噬颗粒较ET-1组明显增多(q=9.4312,P＜0.05),ETB受体拮抗剂组与ET-1组相比差异无统计学意义(q=1.1600,P＞0.05).结论 ET-1能抑制体外培养人TMCs的吞噬能力;ET-1主要通过ETA受体发挥抑制人TMCs吞噬功能的作用.
