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Salusin-a基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

Research on Salusin-a Gene of Eukaryon Expression Vector Constuction and Expression in HEK293 Cells

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科
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关键词: Salusin-a基因 强型绿色荧光蛋白真核表达载体 HEK293细胞 转染

摘要:
目的:研究增强型绿色荧光蛋白真核表达载体Salusin-a(pEG-FP-Salusin-a)的构建及在人胚胎肾细胞系293细胞(HEK293)中的表达。方法:提取人单核细胞系THP-1细胞Salusin-a的mRNA,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Salusin-a基因,克隆入pEGFP-N3载体,双酶切、菌落PCR及测序鉴定pEGFP-Salusin-a质粒。用脂质体转染pEGFP-Salusin-a入HEK293细胞,分为转染细胞组、质粒对照组和空白对照组,检测分析各组荧光蛋白和Salusin-a基因的表达。结果:成功构建pEGFP-Salusin-a质粒,并转染HEK293,细胞转染效率86%,转染细胞组和质粒对照组绿色荧光蛋白的表达明显高于空白对照组(P(0.05);转染细胞组Salusin-amRNA的表达明显高于质粒对照组和空白对照组(P(0.05)。结论:重组pEGFP-Salusin-a质粒能转染HEK293细胞并表达Salusin-a,为Salusin-a基因功能的进一步研究提供了实验基础。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科
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