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小鼠胰岛的分离与纯化

Islet isolation and purification from mice pancreas

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室
出处:
ISSN:

关键词: 胰岛 分离 纯化

摘要:
目的探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法。方法采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶(分别为0.5、1.0、1.5 g/L)消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,葡萄糖刺激释放试验体外测胰岛功能。结果不同浓度的胶原酶在不同时间内消化胰腺后收获的胰岛数量有较大的差异,其中采用0.5 g/L胶原酶V、38℃水浴消化20 min组收获量最大为(230±20)个胰岛细胞团,纯度约为90%。DTZ染色后胰岛呈腥红色,形态完整。葡萄糖刺激释放实验示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的2.3倍。结论胶原酶浓度、消化时间和温度是影响小鼠胰岛分离结果的重要因素,当胶原酶浓度为0.5 g/L,消化时间20 min时可获得数量较多,纯度较好的胰岛细胞。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室
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