目的了解热休克蛋白90（HSP90）对HBV复制的影响并探讨其可能的分子机制。方法构建人HSP90真核表达质粒pXF3H-HSP90（HA-HSP90）,与HBV复制型质粒HBV1.3共转HepG2细胞,ELISA检测细胞上清液HBsAg表达水平,Southern b1ot检测HBV复制中间体的表达。将HA-HSP90表达质粒或HSP90 siRNA转染HepG2细胞,实时定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6以及干扰素应答基因1（IFITl）的表达。将TANK结合激酶1（TBK1）siRNA、HBV1.3、HA-HSP90共染HepG2细胞,Southern blot检测HBV复制中间体的表达。多组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验。结果成功构建了表达HSP90的真核表达质粒HA-HSP90。转染HA-HSP90的HepG2细胞内高水平表达外源蛋白,而未转染质粒的细胞内没有检测到外源蛋白的表达。转染HA-HSP90质粒组细胞上清液中的HBsAg表达量吸光度值为0.124±0.033,明显低于转染空载体pXF3H组的0.340±0.011及未转染组的0.615±0.069（F=61.013,P(0.05）。过表达HSP90也能抑制HBV复制,转染HA-HSP90组、转染空载体pXF3H组与未转染组HBV复制中间体表达量吸光度值分别为108.92±8.59、872.45±13.00和7856.37±60.23,差异有统计学意义（F=28260.00,P(0.05）。在HepG2细胞内高表达HSP90能诱导高水平的IFIT1产生,其中HA-HSP90组与空载体对照pXF3H组IFITl表达的2-△△CT值分别为82.139±0.919和5.579±0.644,差异有统计学意义（F=13.108,P(0.05）,但未检测到IL-1β与IL-6的诱导表达。下调HepG2细胞中干扰素信号通路分子TBK1不影响HSP90对HBV的抑制,其中HSP90组与siTBK1+HSP90组HBV复制中间体条带灰度值分别为1952.64±67.88和2366.64±71.16（F=31.30,P)0.05）。结论 HSP90能够抑制HBV的复制与蛋白表达,这种抑制作用不依赖于TBK1通路,也与IL-1β信号通路无关。