摘要:
目的:探讨ZEB1基因与肝癌的关系,进一步揭示ZEB1基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法:利用基因重组技术构建pCI-neo-ZEB1真核表达载体;脂质体介导转染技术转染肝癌细胞系HepG2。采用Western Blot技术检测重组质粒的转染效率,CCK8比色法测定重组质粒转染对HepG2细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后HepG2细胞凋亡率。结果:重组质粒经Nhel和Xbal双酶切、测序与ZEB1基因序列一致;利用脂质体介导将pCI-neo-ZEB1重组质粒转染HepG2细胞株,经Western Blot技术检测ZEB1基因在蛋白水平稳定高表达;与对照组比较,人HepG2细胞株转染pCI-neo-ZEB1真核表达载体后细胞增殖能力增强,细胞凋亡率明显降低。结论:成功构建重组质粒Pci-neo-ZEB1并转入肝癌细胞株HepG2后,细胞增殖能力增强,凋亡减少。