摘要:
目的将人诱导多潜能干细胞(i PSCs)定向分化为脊髓运动神经元前体细胞(MNP),并比较在有无饲养层两种体系下的分化效率。方法分别在鼠胚胎成纤维细胞饲养层和无饲养层体系中培养人i PSCs。诱导6 d获得神经上皮前体细胞(NEP),诱导12 d获得MNP细胞。倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光染色鉴定i PSCs、NEP、MNP标记物,实时定量聚合酶链反应检测NEP相关基因SOX1、HOXA3,MNP相关基因OLIG2、PAX6,及多能性基因SOX2、OCT4的转录水平。结果两种体系中i PSCs均表达多能性标记物,NEP及MNP均高表达神经相关标记物,低表达多能性标记物,有饲养层体系中NEP细胞SOX1、HOXA3,MNP细胞OLIG2、OCT4基因表达明显高于无饲养层,PAX6和SOX2表达无显著性差异。结论 i PSCs在两种培养体系均可有效分化为MNP细胞,在有饲养层体系中分化效率较高。