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华中科技大学同济医学院附属同济医院
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摘要：
本发明公开了一种青光眼睫状体炎综合征动物模型的构建方法及该动物模型，该构建方法包括如下步骤：1)动物麻醉：对动物进行麻醉，保持动物的眼球微凸；2)眼部麻醉：对动物的左眼和/或右眼进行表面麻醉，作为受试眼；3)病毒感染：将表达EGFP的MCMV基因重组病毒经动物受试眼的角膜中央注入前房中，建立MCMV感染的动物模型。本发明青光眼睫状体炎综合征动物模型的构建方法将小鼠巨细胞病毒注射入小鼠眼前房，构建了PSS动物模型，为PSS的发病机制的探索提供了有效的动物模型。
主权项：
1.一种青光眼睫状体炎综合征动物模型的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：1)动物麻醉：采用腹腔注射浓度为1％的戊巴比妥钠对BALB/c小鼠进行麻醉，保持动物的眼球微凸；2)眼部麻醉：采用滴加浓度为0.5％的盐酸丙美卡因滴眼液对BALB/c小鼠的左眼和/或右眼进行表面麻醉，作为受试眼；3)病毒感染：将表达EGFP的MCMV基因重组病毒经BALB/c小鼠受试眼的角膜中央注入前房中，MCMV基因重组病毒为将EGFP基因插入野生型MCMV基因组中，以使EGFP能够在被感染的细胞中稳定表达；用微量注射泵吸入MCMV基因重组病毒，使用镊子调整小鼠眼球角度，通过玻璃电极垂直穿破受试眼的角膜，针尖进入受试眼的前房后，用微量注射泵将MCMV基因重组病毒缓慢注入；MCMV基因重组病毒的浓度为104-105pfu/mL，注射量为1μL；用微量注射泵将MCMV基因重组病毒缓慢注入的速度为0.1μL/min；使用微电极拉制仪制作玻璃电极，减去尖端解除其气密性，将液体石蜡分别注入10μL微量进样器和玻璃电极以排出空气，推动进样器活塞推至刻度线5-6μL处，擦去排出的石蜡油，将玻璃电极套入进样器针尖，用热熔胶枪封闭两者连接口处，待热熔胶凝固后，将进样器固定于微量注射泵上，再用微量注射泵吸入MCMV基因重组病毒；注射完毕后等待10min，用棉签轻按将玻璃电极拔出，随后继续按压5min；将玻璃电极拔出后使用生理盐水冲洗受试眼的结膜囊后，涂红霉素眼膏，再禁水1～2天后正常进食，建立MCMV感染的动物模型，采用插入EGFP的MCMV进行实验，在病毒引起体征改变的同时，能对病毒感染部位进行可视化定位。
