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华中科技大学同济医学院附属同济医院
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摘要:
一种抗人组织激肽释放酶单克隆抗体及其制备,本发明所述的抗人组织激肽释放酶的单克隆抗体,由小鼠杂交瘤细胞株HTK??CCTCC-200928产生的。所述抗体是针对人组织及肽释放酶尾端的一段12肽的特异性单克隆抗体细胞株;是由杂交瘤细胞株HTK在小鼠体内诱生腹水并纯化而成的;本发明所述的方法,如下步骤:1)将人工合成的人组织激肽释放酶尾端的12肽分别与KLH和BSA交联作为免疫原和包被原;2)免疫小鼠;3)筛选出血清效价最高的小鼠;4)取脾与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞株;5)筛选出杂交瘤细胞株HTK;6)扩大培养杂交瘤细胞,并将其注入小鼠腹腔内诱生腹水;7)纯化腹水后即为抗人组织激肽释放酶单克隆抗体。本发明提供的抗人组织激肽释放酶单克隆抗体特异性强、效价高。
主权项:
一种抗人组织激肽释放酶单克隆抗体,其特征为:所述抗体是针对人组织及肽释放酶尾端的一段12肽的特异性单克隆抗体细胞株;是由杂交瘤细胞株HTK在小鼠体内诱生腹水并纯化而成的;具有较高的亲和力,较强的特异性;可用于Western??bloing及ELISA试剂盒的制备;其采用的多肽序列:NH2??Cys??Lys??Trp??Ile??Glu??Asp??Thr??Ile??Ala??Glu??Asn??Ser??COOH。