目的:建立液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中富马酸单甲酯的方法，并应用于检测中国健康受试者血浆中富马酸单甲酯的浓度。方法:血浆样品用乙酸铵稀释后经过96孔固相萃取板前处理，以含0.5%甲酸的水溶液和纯甲醇作为流动相，采用梯度洗脱方式在ACE Excel 3 C18-AR （2.1 ×50 mm）色谱柱上进行分离，每个样品分析时间为4 min。在电喷雾负电离模式下，多反应监测检测离子对m/z 129.0→m/z 85.0（富马酸单甲酯）和m/z 134.0→m/z 90.0(内标，富马酸单甲酯-d5)。结果:富马酸单甲酯线性范围为4～1 200 ng·mL-1(r2＞0.99)，定量下限为4 ng·mL-1，日内和日间精密度变异系数≤9.7%，准确度相对偏差均在±4.2%以内，平均回收率RSD≤6.6%，基质效应在98.3%～100.9%之间。稳定性实验中，各种储存条件不影响对药品浓度的准确测定。结论：本方法运行时短，灵敏度高，重复性好，适用于富马酸单甲酯血浆浓度定量检测。