摘要:
目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的上皮间质转化(EMT)对SMMC-7721中SP细胞的影响.方法:常规培养人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2,利用流式细胞术分析肝癌细胞系中SP细胞的含量并分选出SP细胞,Western blot检测ABCG2蛋白的表达.TGF-β1诱导肝癌细胞SMMC-7721,动态观察细胞形态学变化,Western blot和免疫荧光检测EMT相关指标钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,通过流式细胞仪分析TGF-β1诱导前后SP细胞含量的变化.结果:利用流式细胞术成功建立了肝癌SP细胞分选体系.检测发现,SMMC-7721中SP细胞含量为4.3%,Western blot显示该SP细胞ABCG2蛋白表达明显上调.而HepG2中未能检测出SP细胞.TGF-β1诱导72h后SMMC-7721细胞发生上皮间质转化,Western blot和免疫荧光检测发现E-cadherin蛋白的表达下调,同时SP细胞含量也明显降低.结论:不同肝癌细胞系中SP细胞含量的差别可能与细胞系的遗传背景和性质不同有关.EMT可能抑制了肿瘤干细胞的增殖,促进肿瘤细胞向侵袭和转移的方向发展.