目的观察人阴茎海绵体平滑肌细胞（hCCMCs）在三维培养系统中的生物学特性。方法体外分离hCCMCs,并用差速贴壁法进行纯化。免疫组化的方法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,进行hCCMCs的鉴定。在单层贴壁培养的基础上,将hCCMCs在胶原凝胶中培养,形成三维培养系统,并对hCCMCs的形态结构、增殖情况进行研究。结果原代培养的hCCMCs细胞形态不均一,经过差速贴壁法纯化后,细胞形态均一,免疫组化显示大多数细胞α-SMA阳性表达。三维培养系统中,hCCMCs在不同层面上呈三维生长。hCCMCs在三维培养系统中培养10d后,细胞数量无明显增殖（P)0.05）,明显低于贴壁培养条件下细胞增殖速率（P(0.01）。结论 hCCMCs三维培养系统可以观察hCCMCs在三维条件下的生长、增殖状况,研究hCCMCs与微环境的相互作用关系,有望为相关研究找到一种更为简单、可控性更强的体内实验替代方法。