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◇ 统计源期刊
文章类型：
单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室
华中科技大学同济医学院附属同济医院
临床免疫研究室
[2] 华中科技大学同济医学院实验医学研究中心
出处：
ISSN：
关键词：
HepG2
215细胞
腺相关病毒2
RNA干扰
HBsAg
摘要：
目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA（shRNA）的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒（pAAV-shHBs-hrGFP）;采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装。收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平。结果酶切鉴定、测序结果表明,pAAV-shHBs-hrGFP载体成功构建。包装收获的rAAV-shHBs-hrGFP病毒液可以感染HepG2.215细胞,并且可以抑制HBsAg和HBeAg的表达。结论制备的rAAV-shHBs-hrGFP病毒载体能够抑制HBV在体外的抗原表达。
基金：
国家传染病防治科技重大专项(2008ZX10002-011)%国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA02Z128)%国家自然科学基金(30700701)
第一作者：
第一作者单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
胡斌,杨燕,刘嘉,等.表达HBsAg特异性siRNA的重组腺相关病毒载体的构建[J].实用肝脏病杂志.2010,13(03):161-165.
