摘要:
目的研究Galectin-9对活化的CD4+T细胞的免疫调节作用,并进一步探讨其作用机制。方法获取野生型C57BL/6小鼠淋巴细胞,利用MACS分选CD4+ naive T细胞,给予anti-CD3(2.5μg/ml)抗体、anti-CD28(5μg/ml)抗体和IL-2(100 ng/ml)刺激,培养3 d。将活化的CD4+T细胞分为3组:正常对照组、Galectin-9组和Galectin-9+α-乳糖组。利用CFSE检测T细胞增殖情况,并动态观察细胞形态变化;检测CD4+CD69+T细胞、Th1、Th2和Th17细胞的比例;并利用ELISA检测淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12、IL-17A和TGF-β1等细胞因子的水平;利用Western blot检测T-bet、GATA-3和ROR-γt等T细胞分化调控蛋白的变化。结果与正常对照组和Galectin-9+α-乳糖组相比,Galectin-9组于2 h时开始出现细胞形态改变,同时CD4+CD69+T细胞、Th1和Th17细胞表达减少(P(0.05),但Th2细胞无明显变化;培养上清液中IFN-γ、IL-12、IL-17A和TGF-β1的表达水平降低(P(0.05),而IL-4和IL-10等Th2型细胞因子水平无明显变化;同时T-bet和ROR-γt的表达水平减少(P(0.05)。结论 Galectin-9抑制活化CD4+T细胞的Th1和Th17型免疫应答,而对Th2型免疫应答无影响,免疫调节的机制可能与其在转录水平影响Th1和Th17特定转录因子的表达有关。