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下调TPH2重组慢病毒载体的构建及鉴定

Construction of the recombinant lentivirus vector with tryptophan hydroxylase 2-siRNA

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1] 武汉市商业职工医院麻醉科 [2] 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科 [3] 武汉市普爱医院疼痛科
出处:
ISSN:

关键词: 色氨酸羟化酶 小干涉RNA 慢病毒 遗传载体

摘要:
目的构建色氨酸羟化酶(TPH)-2基因小干涉RNA的重组慢病毒载体。方法在TPH-2 mRNA序列中选择1个特异性靶序列,体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体,获得重组质粒pU6-MCS-CMV-TPH2-shRNA,后者与慢病毒试剂共转染293细胞,同源重组产生Lentivirus-TPH2-siRNA。经聚合酶链反应(PCR)鉴定目的基因的表达并测定病毒滴度。结果 PCR表明Lentivirus-TPH2-siRNA构建正确,病毒滴度为3×108TU/ml。结论获得的Lentivirus-TPH2-siRNA可以用于转基因瘙痒治疗的实验研究。

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第一作者:
第一作者单位: [1] 武汉市商业职工医院麻醉科
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资源点击量:622 今日访问量:1 总访问量:452 更新日期:2025-07-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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