目的：分析武汉同济医院2012年临床分离菌对常用抗菌药物的耐药情况。方法采用纸片扩散法（K-B法）进行抗菌药物敏感性试验，E 试验检测肺炎链球菌对青霉素和头孢曲松及葡萄球菌对万古霉素的最低抑菌浓度（MIC ），用WHONET5．6软件进行数据分析。结果2012年共获非重复临床分离菌8191株，其中革兰阳性菌2815株，占34．4％，革兰阴性菌5376株，占65．6％。门诊患者共分离294株细菌，前5位分离菌依次为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）、克雷伯菌属和金葡菌；住院非 ICU患者共分离6943株细菌，前5位分离菌依次为大肠埃希菌、金葡菌、不动杆菌属、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌；ICU患者共分离954株细菌，前5位分离菌依次为不动杆菌属、金葡菌、铜绿假单胞菌、肠球菌属和大肠埃希菌。甲氧西林耐药金葡菌（MRSA）和甲氧西林耐药CNS（MRCNS）的检出率分别为58．1％和64．3％。检出对万古霉素和替考拉宁耐药的肠球菌17株，分别为13株屎肠球菌（VanA型）和4株鹑鸡肠球菌（携带VanA和VanC 基因）。屎肠球菌对抗菌药物的耐药率均明显高于粪肠球菌（P＜0．05）。检出碳青霉烯类不敏感肠杆菌科细菌94株。儿童组青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）分离率（18．9％）明显高于成人组（5．0％）；对碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌和不动杆菌属检出率分别为28．1％和56．3％；流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌中β内酰胺酶阳性率分别为41．8％和98．6％。结论本年度分离的病原菌对多数抗菌药物耐药性呈上升趋势，多重耐药情况严重，耐万古霉素肠球菌及多重耐药革兰阴性杆菌，特别是耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌亦呈现上升趋势，应引起临床和医院感染控制部门的重视。