目的:原代培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞作为骨组织工程的种子细胞。方法:取大鼠骨髓,贴壁培养法培养。绘制生长曲线,检测细胞周期。real time PCR检测不同代数BMSCs胞内成骨相关因子mRNA水平。流式细胞仪检测细胞表面标志物。并行成脂及成骨诱导。结果:原代取材后24 h细胞即可贴壁,7 d可生长达培养皿底面积的80%。P3代BMSCs的生长曲线呈S形,近90%的细胞处于G0/G1期。从P0到P5BMSCs中几乎都有内源性bFGF、Shh、Cbfa1、ALP、OC的表达。流式细胞仪检测99.7%的BMSCs胞膜表面同时表达CD29及CD90,不表达CD45。并具有成骨分化及成脂分化的能力。结论:原代培养的BMSCs为骨组织工程提供了可靠的细胞来源。
