目的：对黄连中木脂素类化合物进行分离鉴定，并考察其对蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）的抑制活性。方法：利用高效液相色谱及凝胶柱色谱等技术对黄连95％乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离，将得到的化合物采用紫外（UV）、红外（IR）、质谱（MS）、核磁共振（NMR）等方法鉴定其化学结构；以RK-682为阳性药物，考察分离的各化合物对PTP1B的抑制活性（阳性药物和分离化合物的浓度均为0、15、30、50、65、80、100、120、140、170、200μmol/L），并计算其抑制率和半数抑制浓度（IC50）。结果：共分离得到5个木脂素类化合物，分别鉴定为9-acetyl lanicepside B、Lanicepside A、Woorenogenin、（+）-isolariciresinol和（+）-lariciresin-ol gluciside（即化合物1～5），其中化合物1、2首次从黄连中分离得到。化合物1～5对PTP1B均有一定抑制作用，且与浓度呈正相关，其IC50分别为57、49、71、58、51μmol/L，但其作用均不及RK-682（IC50为32μmol/L）。结论：从黄连中共分离鉴定出了5个木质素类化合物，且均具有一定的PTP1B抑制活性。