资源类型：
Pubmed体系：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
单位：
[1]同济大学苏州研究院生物医药中心,江苏苏州215000
[2]烟台荣昌制药股份有限公司,山东烟台264006
[3]同济大学生命科学与技术学院,上海,200092
[4]同济大学附属同济医院神经内科,上海,200065
[5]同济大学苏州研究院生物医药中心,江苏苏州,215000
出处：
ISSN：
关键词：
c-Met
嵌合抗体
单价抗体
慢病毒表达
摘要：
目的 用抗人间质上皮转化因子(c-Met)阻断型嵌合抗体ch3E1D7表达质粒构建单价抗体慢病毒穿梭质粒,利用慢病毒表达系统实现其在HEK293T细胞中快速表达,并对纯化后抗体的亲和力及中和活性进行检测.方法 设计抗c-Met的单价抗体,命名为mono3E1 D7,利用基因工程技术构建单价抗体三条链的慢病毒表达载体,磷酸钙法转染HEK293T细胞,表达的单价抗体经蛋白A琼脂糖4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测抗体完整性,ELISA检测单价抗体在体外阻断c-Met与其配体HGF结合的生物学活性.结果 感染单价抗体慢病毒的HEK293T细胞上清纯化后,SDS-PAGE分析可见55 ku的重链、25 ku的轻链以及30 ku的杵状结构链(Knob)三条带.且纯化后的单价抗体能与c-Met抗原结合,同时还具有阻断c-Met与HGF结合的中和活性.结论 成功获得抗人c-Met阻断型单价抗体.
基金：
国家科技部“重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09102-043-003)%国家自然科学基金(81371403,81501102)%上海市科委基础研究领域项目(13JC1401102)%苏州市科技计划项目(ZXY2012029)
PubmedID：
第一作者：
第一作者单位：
[1]同济大学苏州研究院生物医药中心,江苏苏州215000
[2]烟台荣昌制药股份有限公司,山东烟台264006
推荐引用方式(GB/T 7714)：
郭佳,蒋明,靳令经,等.抗间质上皮转化因子(c-Met)单价抗体的制备及生物学活性检测[J].细胞与分子免疫学杂志.2016,32(11):1544-1548,1553.
