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◇ CSCD-C
◇ 中华系列
文章类型：
单位：
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
康复医学科
[2]华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
外科学系
骨科
出处：
ISSN：
关键词：
软骨细胞
机械应力
自噬
MEG3
摘要：
目的探讨机械应力调控软骨细胞炎症反应的作用机制。方法体外分离培养新生SD大鼠软骨细胞,经白介素-1β（IL-1β）干预构建软骨细胞炎症模型,设置对照组（IL-1β）、2000μstrain组（2000μstrain应力+IL-1β）、5000μstrain组（5000μstrain应力+IL-1β）,IL-1β浓度为5 ng/ml,以1 Hz应力干预2 h。采用Real-time PCR和Western Blot检测Ⅱ型胶原（Col-2）、基质金属蛋白酶13（MMP13）、自噬标记蛋白LC3、Beclin-1及m-TOR表达,同时检测MEG3表达,采用免疫荧光染色检测自噬小体形成;si-RNA沉默MEG3后,采用Real-time PCR检测LC3及Beclin-1表达。结果2000μstrain组软骨细胞Col-2、LC3、Beclin-1基因及Beclin-1蛋白表达量均较对照组及5000μstrain组明显上调（P(0.05）;2000μstrain组软骨细胞MEG3基因表达量较对照组及5000μstrain组明显下调（P(0.05）;5000μstrain组m-TOR蛋白表达较对照组及2000μstrain组明显增加（P(0.05）;应力组自噬标记蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ相对表达量均较对照组明显减少（P(0.05）;免疫荧光染色显示2000μstrain组自噬小体形成较对照组及5000μstrain组明显增加,5000μstrain组自噬小体形成较对照组及2000μstrain组明显减少（P(0.05）;si-RNA沉默MEG3后,发现LC3及Beclin-1表达量均明显增加（P(0.05）。结论机械应力可影响软骨细胞LncRNA-MEG3表达,从而调控炎症环境中软骨细胞自噬水平。
基金：
国家自然科学基金(81371915,81572094)National Natural Science Foundation of China(81371915,81572094)
第一作者：
第一作者单位：
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科
推荐引用方式(GB/T 7714)：
汪立梅,张家明,吕正涛,等.机械应力调控软骨细胞炎症反应中长链非编码RNA的机制研究[J].中华物理医学与康复杂志.2017,39(02):86-91.
