摘要：
目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对人肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的作用及相关机制.方法 应用脂质体转染的方法,将NGF的真核表达质粒转染入肝癌细胞HepG2中,Western blot检测HepG2细胞转染NGF质粒前后NGF的表达;用悬浮细胞培养模型、软琼脂集落试验及流式细胞学检测的方法观察肝癌细胞HepG2在转染NGF质粒前后的抗失巢凋亡的作用变化.观察向稳定转染NGF真核质粒的HepG2细胞(HepG2-NGF组)中加入NGF的TrkA受体抑制剂CEP-701或者p75NTR受体蛋白后,其细胞早期凋亡的比例变化.结果 肝癌细胞HepG2转染NGF质粒后,Western blot结果 提示NGF的表达明显升高.HepG2细胞在失巢悬浮的状态下可聚集成团生长,且HepG2细胞在贴壁状态及悬浮状态下生长的凋亡比例差异无统计学意义(P>0.05).但是在软琼脂集落试验中,HepG2-NGF细胞组较HepG2细胞组形成细胞集落的数量明显增加,形成细胞团的直径更大;在失巢悬浮状态下,应用流式细胞凋亡检测方法发现HepG2-NGF细胞凋亡比例较HepG2细胞明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).向HepG2-NGF细胞中加入NGF的TrkA受体抑制剂CEP-701或p75NTR受体蛋白后均能增加该细胞失黏附状态下的凋亡比例.结论 肝癌细胞HepG2具有抗失巢凋亡的特性,NGF可以增强HepG2细胞抗失巢凋亡的能力,而抑制NGF的TrkA受体能发挥促凋亡的作用,这将有望成为肝癌的有效干预靶点.
