目的：通过抗菌药物耐药性趋势监测研究（SMART）项目，分析和比较湖北省的华中科技大学同济医学院附属同济医院（以下简称同济医院）和湖南省的中南大学湘雅医院（以下简称湘雅医院）所上报革兰阴性菌的菌群分布与耐药特点，以探寻地域差异对菌群分布及其耐药性的影响，为不同地区感染患者的抗菌药物使用提供参考。方法：按照SMART方案，选取2014年—2019年同济医院和湘雅医院上报的2 159株革兰阴性病原菌作为研究资料，采集病原菌的具体菌种及其药敏结果等信息，分析不同年份2家医院所上报病原菌的菌群分布及其耐药特点。结果：2014年—2019年，2家医院上报的2 159株革兰阴性菌中，占比最高的前6位依次为大肠埃希菌（762株，占35.29%）、肺炎克雷伯菌（424株，占19.64%）、鲍曼不动杆菌（314株，占14.54%）、铜绿假单胞菌（290株，占13.43%）、阴沟肠杆菌（83株，占3.84%）和嗜麦芽窄食单胞菌（81株，占3.75%）;2014年—2017年，同济医院大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌的检出率均高于湘雅医院（P值分别为0.046和＜0.001），而肺炎克雷伯菌的检出率则低于湘雅医院（P=0.002）；相较于2014年—2017年，同济医院2018年—2019年大肠埃希菌的占比由38.63%下降至32.52%（P=0.028），鲍曼不动杆菌的占比由18.60%下降至12.88%（P=0.007），铜绿假单胞菌的占比由13.31%上升至17.79%（P=0.030）;2014年—2019年，2家医院的感染类型主要为腹腔感染（819例）、呼吸道感染（673例）和尿路感染（557例）；2014年—2017年，同济医院和湘雅医院均以腹腔感染的占比为最高（分别为46.77%和40.52%）；而2018年—2019年，同济医院则是以呼吸道感染的占比为最高（为49.61%）;2017年同济医院上报的肺炎克雷伯菌对厄他培南、亚胺培南、环丙沙星、头孢曲松和头孢噻肟的耐药率均低于湘雅医院（P＜0.05），而铜绿假单胞菌对美罗培南、左氧氟沙星的耐药率均低于湘雅医院（P＜0.05）;2017年同济医院上报的铜绿假单胞菌对亚胺培南、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率与2016年相比也均出现了明显下降（P＜0.05）;2018年—2019年同济医院上报的肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星的耐药率，鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星、头孢他啶的耐药率，铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、环丙沙星的耐药率较2014年—2017年均明显下降（P＜0.05）;2家医院多重耐药大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌的检出率均在85.00%以上，而湘雅医院多重耐药铜绿假单胞菌的检出率高于同济医院（P＜0.05）;2家医院难治性鲍曼不动杆菌的检出率均在70.00%以上，难治性大肠埃希菌的检出率均较低（＜10.00%），湘雅医院难治性肺炎克雷伯菌的检出率高于同济医院（P＜0.05）。结论：2家医院多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的检出率仍处于高位，难治性鲍曼不动杆菌的检出率也较高，临床仍需采取相应的管控措施。